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谁,什么和为什么高效液相色谱

三种HPLC系统的紫色线图

什么是HPLC,它是如何工作的?

HPLC代表高压液相色谱法-色谱法是一种根据其对材料(固定相)和液体(流动相)的亲和力分离混合物不同部分的方法。许多人都熟悉色谱法的概念,在学校的科学课上已经学过基本的纸色谱法来分离墨水或其他混合物。HPLC使用相同的概念,但可用于分离大量的分析物,以及识别和量化被分离的分析物。

纸色谱法。第一张图显示了一个墨点,而第二张图显示了不同颜色的分离
高效液相色谱法的概念与纸层析法相当,尽管高效液相色谱法有更广泛的实际应用

HPLC的理论是惊人的简单,尽管在实践中,它可能需要时间和经验,成为真正胜任HPLC分析。高效液相色谱系统使用色谱柱——本质上是一个装满吸附剂(固定相)的管子。混合物中的不同组分(分析物)对固定相和流动相的吸引力不同,因此将以不同的速率通过色谱柱。一种经过深思熟虑的色谱方法,使用正确的色谱柱和成分,将导致分析物的最佳分离,使它们能够被单独识别和定量。

高效液相色谱法最常见的应用是什么?

高效液相色谱法是一种非常通用的分析技术,用于分离混合物中的不同成分。不需要任何额外的设备,就可以可靠地识别和量化组件,使其成为一项非常强大的技术。

HPLC广泛应用于工业、环境、制药和食品分析和测试,与FT-IR等其他技术一起用于检查产品纯度。它是检测和定量血液和尿液中的物质和代谢物的强大工具,使其成为医学诊断,医学研究和药物测试的理想选择。在研究和开发中,HPLC的可能性几乎是无限的。如果感兴趣的分析物溶解在溶剂中,或可以提取到溶剂中,则可以使用高效液相色谱法对其进行识别和定量。常见的分析物包括杂质、药物、食品添加剂、生物标记物、碳氢化合物、离子和盐。

实验室的高效液相色谱系统和计算机

高效液相色谱系统的不同部分是什么?

由于HPLC可用于如此广泛的应用,因此设备将有不同的配置,以最适合所需的结果。研究您感兴趣的分析物的最佳设置和方法是重要的。

泵控制液体(流动相)通过色谱柱的流量。等距泵是最基本的,使用连续的稳定流量通过柱输送流动相。对于更复杂的方法,可能首选梯度泵。这允许用户改变流动相的溶剂组成,在混合物中有更多(或更复杂)的分析物时提供更好的分离。梯度泵可以是二元或四元泵,能够分别混合指定比例的两种或最多四种溶剂。

脱气器

不是所有的系统都会使用除气器。这些装置(顾名思义)用于在溶剂被泵入色谱柱之前从溶剂中除去气体。这在混合溶剂时特别有用,因为要排出溶解气体。这些会形成气泡,导致色谱柱中的压力下降,以及洗脱时间和峰值分离的问题。

注射器

最基本的HPLC系统将使用手动注射-只需在泵附近设置一个注射端口。对于处理大量样品的实验室,大多数用户更喜欢自动采样器,它允许样品提前准备并自动运行。手动进样会占用大量的时间,所以一些用户可能更喜欢自动进样器,即使是少量的样品。

在高效液相色谱系统中,女性手戴橡胶手套,将样品放入带蓝色盖子的玻璃小瓶中,放入自动进样器架上。高效液相色谱分离化合物
许多HPLC系统有一个自动进样器,允许许多样品的制备和自动运行

色谱柱是分析物分离的地方。有许多选择的列,不同的长度和固定相组成。色谱柱通常为每种方法专门选择,以确保特定分析物的最佳分离。

柱温箱

也被称为柱室,柱炉保持柱在一个稳定的,可控的温度。色谱方法可以改变温度和时间斜坡,以优化分析物的分离和降低流动相的粘度。

高效液相色谱柱炉
柱式烘箱用于保存和加热色谱柱。温度可以改变,以优化洗脱时间和峰值分离

探测器

如果没有检测器,就无法知道分析物何时从色谱柱中洗脱,或测量它们是什么。有一系列的探测器,以适应不同的应用。紫外/可见检测器可以是固定波长或可变波长,这取决于实验室的需要。二极管阵列探测器允许同时监测多个波长;这些对于方法开发非常有用。同样,荧光探测器可以是单波长或多波长,这取决于用户的需要。

对于一些正在寻找范围广泛的未知分析物的用户,可能需要更强大的检测方法,因此HPLC系统可以与额外的外部检测器(如质谱仪)相结合。

里士满科学公司如欧宝体育足球何支持您的HPLC分析?

我们拥有丰富的经验,为客户构建定制的HPLC系统,从最基本的系统设计用于监测一个简单的分析物,到更复杂的构建用于广泛的化合物。我们内部的HPLC工程师是高素质的,能够就系统需求,以及翻新和维修系统和单个单元提供建议。

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